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電泳設備及電泳技術(shù)應有范圍簡(jiǎn)介
更新時(shí)間:2015-05-19 點(diǎn)擊次數:1221

電泳:在直流電場(chǎng)中,帶電荷的粒子向帶符號相反的電極移動(dòng),稱(chēng)為電泳。電泳也是一種分離的方法和技術(shù),就是分離和鑒定混合物中帶電粒子(包括離子、高分子多電解質(zhì)、膠體粒子、病毒顆粒以致活的細胞,如細菌和紅細胞等)的技術(shù)。


電泳裝置:由電泳儀(電源)和電泳槽(混合樣品電泳時(shí)的支持物)組成。


電泳儀(電源):為混合樣品電泳時(shí)提供直流電場(chǎng)。電泳儀可提供恒定電壓、恒定電流和恒定功率。


電壓分為:高壓>1500V;中壓  500-1500V;低壓<500V


電流分為:大電流>500mA;中電流  100-500 mA;小電流<100 mA


功率為分:大功率>200W;中功率  60-200W;小功率<60W


選擇何種規格的電泳儀(電源)視電泳類(lèi)型及樣品分子量大小。


通常高電壓電泳適用于分離小分子質(zhì)量物質(zhì),如氨基酸、肽、抗生素等。


恒定功率電源適用于做等電聚焦電泳。


大電流適用于做轉移電泳。


低電壓電泳適用于瓊脂糖凝膠電泳法分離大分子核酸。


使用zui多的是中壓電泳儀(如DYY-6),適用于聚丙烯酰胺凝膠電泳,此法普遍用于分離蛋白質(zhì)及較小分子的核酸。


電泳槽:常用的電泳槽有垂直電泳槽(主要用于分離蛋白質(zhì))和水平電泳槽(主要用于分離核酸樣品)。為蛋白質(zhì)和核酸的分離而設計的平板電泳儀,通常有水平和垂直平板二類(lèi)。蛋白質(zhì)的電聚焦和免疫電泳常采用水平板電泳形式,而蛋白質(zhì)的其他形式區帶電泳電泳則常采用垂直板電泳形式。特別是使用不連續體系沖液進(jìn)行電泳時(shí),垂直板電泳要比水平板電泳簡(jiǎn)便得多。實(shí)驗室普遍使用的一種垂直板電泳(附圖)所示。2塊平板玻璃,根據電泳儀的大小裁定。其中一塊上端開(kāi)槽口,一般槽口的大小比例是:如果平板玻璃是17cm*19cm標準平板,那么所開(kāi)槽口的大小是深2.0cm,長(cháng)14cm。平板玻璃厚度常用3mm。2塊平板玻璃之間、左、右、下3邊加上墊片(又稱(chēng)隔條)就可組裝成一個(gè)平板凝膠模。為了防止凝膠溶液滲漏和制成一塊厚薄均勻的平板凝膠,必須使用強有力的夾子,將二塊平板玻璃夾牢。墊片的厚度決定平板凝膠的厚度,zui常用的是1.5mm厚。在平板凝膠膜中,灌澆凝膠溶液至一定高度后,插入加樣梳,就可制成加樣槽。加樣槽體積的大小決定于加樣梳齒的大小。因此,利用改變加樣梳齒的多少和大小,就可方便地獲得需要的加樣槽。


水平板型電泳槽是目前進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳使用zui普遍的裝置。水平板型凝膠通常在一塊可安放電泳槽平臺的玻璃板或兩側帶有擋板的膠模上灌制。如用玻璃板,則灌膠前需用膠帶紙或醫用膠帶將四周貼成一個(gè)圍墻,以防膠液滲漏。如使用與電泳槽配套購置的制膠模,則只需在灌膠前封住兩端。


電泳類(lèi)型:濾紙電泳、醋酸纖維素膜電泳、淀粉凝膠電泳、瓊脂糖凝膠電泳、免疫電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳等。


電泳目的:電泳技術(shù)廣泛應用于蛋白質(zhì)、氨基酸、核酸、酶、多肽、激素類(lèi)、嘧啶和其他有機化合物甚至無(wú)機離子的分離、鑒定、純化、制備。


電泳技術(shù)使用領(lǐng)域:凡涉及到生物科學(xué)、生物技術(shù)、生物制藥、生物工程(遺傳工程、細胞工程、蛋白質(zhì)工程)的高校,如生命科學(xué)學(xué)院、農學(xué)院、醫學(xué)院,及有科研能力的醫院、生物工程公司等都離不開(kāi)電泳技術(shù)。

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