超微量分光光度計的功能優(yōu)點(diǎn)

那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡(jiǎn)單介紹一下關(guān)于超微量分光光度計的功能優(yōu)點(diǎn):

超微量分光光度計不僅涵蓋了可見(jiàn)光分光光度計的功能而且也可以進(jìn)行紫外分光光度計的應用，常用以下幾方面：

核酸的定量

核酸的定量是超微量分光光度計使用頻率高的功能?？梢远咳苡诰彌_液的寡核苷酸，單鏈DNA、雙鏈DNA，以及RNA。核酸的高吸收峰的吸收波長(cháng)260nm。每種核酸的分子構成不一，因此其換算系數不同。定量不同類(lèi)型的核酸，事先要選擇對應消光因子。如：1OD的吸光值分別相當于50μg/ml的dsDNA，37μg/ml的ssDNA，40μg/ml的RNA，30μg/ml的Olig。測試后的吸光值經(jīng)過(guò)上述系數的換算，從而得出相應的樣品濃度。除了核酸濃度，分光光度計顯示幾個(gè)非常重要的比值表示樣品的純度，如A260/A280的比值，用于評估樣品的純度，因為蛋白的吸收峰是280nm。純凈的樣品，比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8或者2.0，表示存在蛋白質(zhì)或者酚類(lèi)物質(zhì)的影響。A230表示樣品中存在一些污染物，如碳水化合物，多肽，苯分等，較純凈的核酸A260/A230的比值大于2.0。

UV-VIS常規可見(jiàn)-紫外檢測

全波長(cháng)超微量分光光度計可以像普通的紫外-可見(jiàn)分光光度計一樣行使功能。如BIO-DL MicroDrop可以顯示從185到910nm的光波下樣品的吸光值。較多可以同時(shí)檢測40個(gè)波長(cháng)下的吸光值并把數據顯示在報告中。

蛋白質(zhì)的直接定量(UV法)

這種方法是在280nm波長(cháng)，直接測試蛋白。蛋白質(zhì)測定過(guò)程非常簡(jiǎn)單，先測試空白液，然后直接測試蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)直接定量方法，適合測試較純凈、成分相對單一的蛋白質(zhì)。紫外直接定量法相對于比色法來(lái)說(shuō)，速度快，操作簡(jiǎn)單；但是容易受到平行物質(zhì)的干擾，如DNA的干擾；另外敏感度低，要求蛋白的濃度較高。

比色法蛋白質(zhì)定量

 蛋白質(zhì)通常是多種蛋白質(zhì)的化合物，比色法測定的基礎是蛋白質(zhì)構成成分：氨基酸(如酪氨酸，絲氨酸)與外加的顯色基團或者染料反應，產(chǎn)生有色物質(zhì)。有色物質(zhì)的濃度與蛋白質(zhì)反應的氨基酸數目直接相關(guān)，從而反應蛋白質(zhì)濃度。

比色方法一般有BCA，Bradford，Lowry等幾種方法。

Lowry法：以早期的Biuret反應為基礎，并有所改進(jìn)。蛋白質(zhì)與Cu2+反應，產(chǎn)生藍色的反應物。但是與Biuret相比，Lowry法敏感性更高。缺點(diǎn)是需要順序加入幾種不同的反應試劑;反應需要的時(shí)間較長(cháng);容易受到非蛋白物質(zhì)的影響;含EDTA，Tritonx-100，ammoniasulfate等物質(zhì)的蛋白不適合此種方法。

BCA(Bicinchoninineacidassay)法：這是一種較新的、更敏感的蛋白測試法。要分析的蛋白在堿性溶液里與Cu2+反應產(chǎn)生Cu+，后者與BCA形成螯合物，形成紫色化合物，吸收峰在562nm波長(cháng)。此化合物與蛋白濃度的線(xiàn)性關(guān)系*，反應后形成的化合物非常穩定。相對于Lowry法，操作簡(jiǎn)單，敏感度高。但是與Lowry法相似的是容易受到蛋白質(zhì)之間以及去污劑的干擾。

細胞密度(OD600)

實(shí)驗室確定生長(cháng)密度和生長(cháng)期，多根據經(jīng)驗和目測推斷的生長(cháng)密度。在遇到要求較高的實(shí)驗，需要采用分光光度計準確測細胞密度。OD600是追蹤液體培養物中微生物生長(cháng)的標準方法。

以上就是上海金鵬分析儀器有限公司為大家整理總結關(guān)于超微量分光光度計的功能優(yōu)點(diǎn)。

我們上海金鵬分析儀器有限公司是專(zhuān)業(yè)生產(chǎn)超微量核酸蛋白測定儀、化學(xué)發(fā)光成像系統、凝膠成像分析系統、紫外分析儀、核酸蛋白檢測儀、紫外檢測儀、蛋白質(zhì)分離純化系統、光化學(xué)反應儀、旋渦混合器、恒流泵、自動(dòng)部分收集器等十幾個(gè)系列產(chǎn)品的廠(chǎng)家，歡迎大家前來(lái)訂購。