液相色譜柱正確使用方法
更新時(shí)間:2016-07-21 點(diǎn)擊次數:1310
一、樣品方面
1.除去微粒及雜質(zhì)
2.了解樣品在流動(dòng)相中的溶解度
如溶樣品的溶劑不是流動(dòng)相,一定要用流動(dòng)相試溶解度,防止其在流動(dòng)相中析出
3.了解樣品與色譜柱的基質(zhì)/填料是否有相互作用
二、流動(dòng)相方面
1.除去微粒
純度的要求:超純水,梯度實(shí)驗時(shí)水中有機雜質(zhì)含量要低;緩沖液的PH值,在填料的允許范圍內;緩沖液(鹽)的濃度;有機溶劑:色譜純,雜質(zhì)含量盡量低,并與填料相匹配
2.流動(dòng)相對樣品的溶解度
有機溶劑或水的比例
三、色譜柱的清洗
對所做的樣品要有充分的了解,用對該樣品洗脫能力zui強的流動(dòng)相清洗
硅膠柱的一般方法是先用甲醇洗去極性雜質(zhì),然后用干燥的二氯甲烷、正庚烷100~200ml依次活化
鍵合相柱(烷基)的一般方法是用20倍體積的甲醇-氯仿-甲醇-水依次沖洗
(記?。好糠N色譜柱可能性有特定的方法,一定要先看其使用說(shuō)明?。?br />四、色譜柱的存放
存放前的處理要除去雜質(zhì)、緩沖鹽
合適的存放溶劑
避免色譜柱床的干涸
避免機械震動(dòng)
防止細菌生長(cháng)
注意存放的溫度