PCR新手指南：PCR現在又擴增不出來(lái)了怎么辦？
更新時(shí)間：2016-06-01 點(diǎn)擊次數：2529
這個(gè)問(wèn)題是常見(jiàn)的問(wèn)題，就是一個(gè)PCR實(shí)驗一直都做得很好，停一段時(shí)間后再做就不行了。一通亂找原因后還是不行，很痛苦！
找問(wèn)題要從大到?。?/p>
1、PCR擴增體系問(wèn)題
用其他正在進(jìn)行的且擴增正常的模板和引物證明PCR擴增體系沒(méi)有問(wèn)題，即PCR反應混合物、水、取液器、PCR儀、操作等都是好的（陽(yáng)性對照）
2、引物問(wèn)題
用以前擴增產(chǎn)物做模板（稀釋50倍），證明引物沒(méi)有問(wèn)題
3、只是模板問(wèn)題了。
因為樣本降解的可能性比引物降解的可能性高得多。也可能是樣本中的抑制物過(guò)多（新鮮時(shí)沒(méi)有溶出來(lái)）。
不要靠運氣找問(wèn)題，先做*條很重要。亂找問(wèn)題常常讓人失去信心的。
