微柱液相色譜儀技術(shù)經(jīng)歷了數十年的發(fā)展，從早期的使用不銹鋼管的微孔填充柱，發(fā)展到使用熔融硅膠毛細管的毛細管填充柱。進(jìn)入20世紀80年代后期，隨著(zhù)生命科學(xué)研究、臨床醫學(xué)研究、新型藥物研制、生物工程技術(shù)的發(fā)展、對產(chǎn)品質(zhì)量控制和環(huán)境監測指標的升級，提供了大量組成復雜樣品的分析任務(wù)。

為此必須提供具有分離能力和高靈敏度檢測能力的全新分析方法，并用于微量和痕量組分的分離和檢測。

納米（標度）液相色譜技術(shù)和超高壓液相色譜技術(shù)正是適應上述分析要求，先后于20世紀80年代末期和90年代初期先后提出。他們突破了常規液相色譜儀理論的約束，采用粒徑約為1.0μm的粒子填充色譜柱。在實(shí)驗裝置上采用當代的技術(shù)，用微流路處理器提供納升數量級微小、穩定的流動(dòng)相流量，用微芯片制作技術(shù)在硅晶片上蝕刻出納米尺寸的色譜柱管，制造了填充壓力高達410MPa（60000psi）的高壓輸液泵和耐壓1030MPa（150000psi）的高壓進(jìn)樣閥，實(shí)現了前人從未實(shí)踐過(guò)的毛細管液相色譜分離技術(shù)。創(chuàng )建了理論塔板數高至20~40萬(wàn)塊/m的高柱效，完成了組成復雜生物樣品的分離，還實(shí)現了與MS的聯(lián)用。從這些新技術(shù)的進(jìn)展，可充分看到色譜工作者的創(chuàng )造能力。

用于微柱液相色譜儀分析的高壓輸液泵，其輸出流量應當準確，并有良好的重復性。由于輸出流量較小，早期曾使用氣動(dòng)放大泵和螺桿注射泵，后經(jīng)改造常規往復式柱塞泵，使其也可輸出低流量流動(dòng)相。

現多采用小型螺桿注射泵和往復式柱塞泵。往復式柱塞泵由于螺桿注射泵，它具有對大的柱反壓的補償能力，快的流路平衡和穩定性，并可用于梯度洗脫。由于液流的混合有一定的困難，在低流速下柱加壓是一個(gè)耗費時(shí)間的過(guò)程，若在梯度洗脫中使用螺桿注射泵，會(huì )明顯的增加梯度延遲。

當對微柱進(jìn)行二元、三元、四元梯度洗脫時(shí)，使用低壓梯度仍是的方法，此時(shí)應使用精密時(shí)間比例電磁閥。此閥能準確控制每種溶劑的比例，確保不存在滲漏和粘結，使每種低流量溶劑在小體積混合器中*混合。當使用高壓梯度洗脫時(shí)也必須使用小體積的混合器，為保證高的混合效率，混合器也可使用一個(gè)很小的填充柱。對內徑1.0mm、長(cháng)200~300mm的微柱，其柱體積約為100~150μL；對內徑0.5mm、長(cháng)250mm的微柱，其柱體積已小至30μL。我們由此可知，微柱液相色譜儀梯度洗脫中所用混合器的體積要遠小于柱體積，并要具有很高的混合效率，這在儀器制作商的難度很大。當然，由于液相色譜儀廠(chǎng)家的技術(shù)和各方面服務(wù)是不盡相同的，要想儀器、使用壽命達到zui長(cháng)，那么選擇一家比較專(zhuān)業(yè)的廠(chǎng)家是異常重要的。如果您有興趣，魯創(chuàng )分析儀器歡迎各界有志之士前來(lái)參觀(guān)指導!