366nm檢測用紫外燈, 用于水及食物中的微生物檢測,如水中大腸埃希氏菌在含MUG 的培養基中培養后,即會(huì )產(chǎn)生熒光反應也可用于實(shí)驗室蛋白質(zhì)及化合物的檢測。
大腸埃希氏菌定義
大腸埃希氏菌是指能產(chǎn)生β-半乳糖苷酶(β-D-galactosidase)分解ONPG(Ortho-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside)使培養液呈黃色,能產(chǎn)生β-葡萄糖醛酸酶(β-glucuronidase)分解MUG(4-methyl-umbelliferyl-β-D-glucuronide)使培養液在波長(cháng)366nm紫外光下產(chǎn)生熒光的細菌。
檢測重要性
《生活飲用水標準檢驗方法》GB/T 5750-2006中將大腸埃希氏菌列入檢測項目中。并在解讀《生活飲用水衛生標準》GB5749-2006中闡述:“只有埃希氏大腸桿菌是糞源特異性的,是zui準確和專(zhuān)一的糞便污染指示"。
二、用途 :
大腸埃希氏菌測定熒光觀(guān)察使用方法:將臺式紫外光燈置于暗處,插上電源,將經(jīng)過(guò)24小時(shí)培養后的EC-MUG管在燈下照射,如有藍色熒光產(chǎn)生則為大腸埃希氏菌陽(yáng)性管;
三、注意事項:
每次觀(guān)察時(shí),用一個(gè)沒(méi)開(kāi)封的EC-MUG管和被測的EC-MUG管在紫外光燈同時(shí)觀(guān)察,如果被測的EC-MUG管產(chǎn)生熒光,在紫外光燈下與沒(méi)開(kāi)封的EC-MUG管比較,有明顯的區別。每次測試完后將電源拔掉。
四、具體方法:取供試液10ml(相當于供試品1g、1ml),直接或處理后接種至適量(不少于100ml)的膽鹽乳糖培養基中,培養18--24小時(shí),必要時(shí)可延長(cháng)至48小時(shí).
取上述培養物0.2ml,接種至含5mlMUG培養基的試管內,培養,于5小時(shí)、24小時(shí)在366nm紫外線(xiàn)下觀(guān)察,同時(shí)用未接種的MUG培養基作本底對照.若管內培養物呈現熒光,為MUG陽(yáng)性,不呈現熒光,為MUG陰性.觀(guān)察后,沿培養管的管壁加入數滴靛基質(zhì)試液,液面呈玫瑰紅色,為靛基質(zhì)陽(yáng)性,呈試劑本色,為靛基持陰性.本底對照應為MUG陰性和靛基質(zhì)陰性.
如MUG陽(yáng)性,靛基質(zhì)陽(yáng)性,判供試品檢出大腸埃希菌;
如MUG陰性,靛基質(zhì)陰性,判供試品未檢出大腸埃希菌;如MUG陽(yáng)性,靛基質(zhì)陰性,或MUG陰性,靛基質(zhì)陽(yáng)性,則應取膽鹽乳糖培養基的培養物劃線(xiàn)接種于曙紅亞甲藍瓊脂培養基或麥康凱瓊脂培養基的平板上,培養18--24小時(shí).
若平板上無(wú)菌落生長(cháng),或生長(cháng)的菌落與表所列的菌落形態(tài)特征不符,判供試品未檢出大腸埃希菌.若平板上生長(cháng)的菌落與表所列的菌落形態(tài)特征相符或疑似,應進(jìn)行分離,純化,染色鏡檢和適宜的生化試驗,確認是否為大腸埃希菌.
大腸菌形態(tài)特征
曙紅亞甲藍:呈紫黑色、淺紫色、藍紫色或粉紅色,菌落中心呈深紫色或無(wú)明顯暗色中心,圓形,稍凸起,邊緣整齊,表面光滑,濕潤,常有金屬光澤