成像設備是生物實(shí)驗室zui為常用的儀器之一，直接為您的論文提供影像依據。而這些影像質(zhì)量的好壞，有時(shí)候甚至決定著(zhù)您的論文能否發(fā)表。擁有一臺好的、運行穩定的設備也是導師和技術(shù)主管的心愿。那么，如何從紛繁的市場(chǎng)上選擇到一款好的成像設備呢？很多號稱(chēng)“"的設備是否真的能夠打滿(mǎn)分呢？本文教您選擇成像系統的三大要要點(diǎn)：  

要點(diǎn)一：實(shí)踐出真知，試用才知道  
每個(gè)成像設備廠(chǎng)家都對自己的產(chǎn)品是“王婆賣(mài)瓜，自賣(mài)自夸"，經(jīng)常給您上兩個(gè)小時(shí)課中間還不用休息，什么“技術(shù)"、“人性化設計"、“生命科學(xué)產(chǎn)業(yè)大獎"。只有您想不到的，沒(méi)有他做不到的，可是，這些東西對用戶(hù)到底有什么意義？就沒(méi)有幾個(gè)人說(shuō)得清了！好用才是硬道理！任憑你說(shuō)得天花亂墜，拿來(lái)我試試，不就什么都清楚了！現在多數廠(chǎng)商都提供Demo機服務(wù)，還有技術(shù)人員現場(chǎng)答疑解惑，那就請各位上場(chǎng)，誰(shuí)的性能好，價(jià)格優(yōu)，那我就要誰(shuí)的！  

當然，我們的實(shí)際測試結果僅僅是針對我們自己的樣品和現場(chǎng)demo的機器而已。我們不能據此對相關(guān)品牌和相關(guān)型號做太多評判。由于具體應用的限制、操作技巧的差異以及可能的儀器狀態(tài)的區別，我們有可能沒(méi)有給出公允的評價(jià)。但無(wú)論如何，這些訊息對我們采購者和使用者來(lái)說(shuō)都是非常重要的。  

要點(diǎn)二：只選符合自己實(shí)驗室要求的設備
市場(chǎng)上各品牌、各型號的成像設備林林種種，從成像原理上可以分成兩大類(lèi)，分別是拍照成像和掃描成像。拍照成像簡(jiǎn)單說(shuō)就是樣品和相機的相對位置不動(dòng)，可以進(jìn)行單次成像或多次成像；而掃描成像則是相機對樣品進(jìn)行局部成像，然后通過(guò)樣品或相機的移動(dòng)對整個(gè)樣品進(jìn)行成像。拍照成像目前主要采用CCD相機成像，由于可以設置不同的曝光時(shí)間，常被用來(lái)進(jìn)行微弱的化學(xué)發(fā)光及生物發(fā)光的成像。而掃描成像則由于精度高、重復性好被廣泛用于大型樣品以及多通道成像中?？梢哉f(shuō)，對于大型樣品或多通道應用，能選擇掃描成像的，盡量不要選擇拍照成像！原理搞清楚了，選擇起來(lái)就簡(jiǎn)單了！不同的原理導致了不同應用的*選擇，所以千萬(wàn)不要相信什么“王"之類(lèi)的話(huà)，沒(méi)有任何一款機器可以通吃所有應用領(lǐng)域。

下面就實(shí)驗室zui常見(jiàn)的一些應用簡(jiǎn)單的說(shuō)明選擇的依據：  
蛋白電泳凝膠：一般此類(lèi)凝膠采用考染或銀染，白光透射成像。對于小型凝膠您可以選擇一般的凝膠成像設備，但是對于大型凝膠，特別是雙向電泳凝膠，由于CCD拍照成像會(huì )有幾何扭曲，而且透鏡效應也會(huì )導致不同區域的信號強度差異，另外CCD拍照也無(wú)法保證不同凝膠的成像參數保持一致，因此掃描成像是選擇。  

核酸電泳凝膠：一般此類(lèi)凝膠都采用EB染色、紫外激發(fā)，而且凝膠較小。推薦采用一般的凝膠成像設備即可完成。 

轉印膜：一般轉印膜有比色法顯色、同位素、化學(xué)發(fā)光和熒光等不同檢測手段。比色法顯色就是產(chǎn)生有顏色的條帶或斑點(diǎn)，一般采用普通的凝膠成像設備即可；同位素可以采用壓膠片曝光的方法，但是費時(shí)、費力而且容易過(guò)飽和，比較通用的方法是由FujiFilm在1981年發(fā)明的磷屏成像技術(shù)，獲得信號潛影的磷屏通過(guò)激光掃描就可以獲取同位素的信號。而化學(xué)發(fā)光是目前zui常用的蛋白印跡的檢測手段，無(wú)疑，冷CCD拍照成像對這種微弱的光信號是zui合適的。熒光是所有這些檢測手段中zui令人贊嘆的和zui有前景的！這不僅僅是因為熒光染料具有zui寬的動(dòng)態(tài)范圍，而且還在于它能夠為我們提供多通路的檢測途徑。當然，您可以使用單一熒光檢測，這時(shí)您對凝膠成像設備的要求就包括了新的激光光源和相應的濾光片。如果您是一個(gè)主義者，或者您需要對鄰近或重疊的目標分子進(jìn)行成像，那么多通道熒光檢測是您的*！這時(shí)掃描成像是*選擇，這樣選擇不僅僅是因為掃描成像能夠帶來(lái)更高的靈敏度和分辨率，更重要的是，不同通道之間沒(méi)有幾何扭曲，擬合性好。  

微孔板及其他特殊需求：對于拍照成像而言，由于幾何扭曲的問(wèn)題，對微孔板成像就變得比較復雜了，一般必須一個(gè)的校正裝置才可完成。當然，如果采用掃描成像一般不需要任何額外附件。很多實(shí)驗室現在都對小動(dòng)物成像非常感興趣，然而對小動(dòng)物進(jìn)行真的不是一件簡(jiǎn)單的事，一方面小動(dòng)物需要進(jìn)行麻醉和固定；另一方面還需要對信號位置進(jìn)行三維定位。因此，能同時(shí)提供功能、代謝和解剖圖像的PET/CT是進(jìn)行這類(lèi)成像的zui有力的工具。限于篇幅，這部分將不做更多介紹。  

要點(diǎn)三 參數細節很重要  
當我們在考察儀器Demo的情況后還是無(wú)法分辨其性能之優(yōu)劣時(shí)，除了可以了解兄弟科室的使用情況和評價(jià)，就只能推開(kāi)儀器看參數了。當然看參數是有竅門(mén)的。很多成像儀的參數寫(xiě)了幾十條，其實(shí)zui關(guān)鍵的就那么幾條。我們對比不同廠(chǎng)商的參數時(shí)一定要注意只比關(guān)鍵的，而對那些無(wú)關(guān)痛癢的參數則大可以視而不見(jiàn)！另外，千萬(wàn)不要被廠(chǎng)商自己給相應產(chǎn)品的評分所欺騙，他的那套評分系統僅僅是相對自己的產(chǎn)品而言，即使給出了zui高分“5"分的指標，和其他廠(chǎng)商產(chǎn)品的性能相比，可能還是屬于垃圾級的！  

對于掃描成像而言，靈敏度一般不是問(wèn)題，我們zui關(guān)注的應該是分辨率，當然分辨率只要達到我們的要求即可，對于小型的凝膠、膜和微孔板來(lái)說(shuō)，一般分辨率在25um左右應該是足夠了！在滿(mǎn)足分辨率后，一個(gè)更重要的參數擺在我們的面前，那就是動(dòng)態(tài)范圍，簡(jiǎn)單的說(shuō)，動(dòng)態(tài)范圍決定著(zhù)你能否同時(shí)在一張膠上同時(shí)看到強的信號和弱的信號，而且他們之間保持比較好的定量關(guān)系！一般動(dòng)態(tài)范圍采用數量級來(lái)表示，這個(gè)數越大，表明動(dòng)態(tài)范圍越寬！ 

對于激光掃描成像系統，情況就復雜一些。從激光器、濾光片到分光鏡和檢測器還有好多需要考慮和比較的。同樣限于篇幅，以后在做詳細介紹。  

下面主要介紹實(shí)驗室zui常用的凝聚成像儀的參數選擇。根據原則一，如果您主要用它來(lái)拍普通核酸膠或蛋白膠，那么幾乎市場(chǎng)上所有的成像儀都可以很好的滿(mǎn)足您的需求，這時(shí)除了價(jià)格這個(gè)決定因素外，能比較的也就是一些諸如“操作是否簡(jiǎn)便、外形是否時(shí)尚"等無(wú)關(guān)痛癢的指標了！真正需要花心思考察的可能就是準備做化學(xué)發(fā)光的用戶(hù)，他們對敏感度要求高，同時(shí)還要求比較寬的動(dòng)態(tài)范圍。
  
要想捕獲到微弱的化學(xué)發(fā)光，需要上佳的CCD相機和鏡頭。一般來(lái)說(shuō)，CCD相機的冷卻溫度和背景噪音息息相關(guān)，溫度越低，噪音就越低。因此，-25℃的制冷溫度是對相機的*個(gè)要求（更低的溫度，噪音降低效果不明顯，而量子效率又會(huì )受很大影響）；另外，較大的像素能夠提供更高的捕光效率；所以對于相同大小的CCD芯片，需要注意像素的尺寸。鏡頭的參數就簡(jiǎn)單了，由于我們只需要觀(guān)察近距離的樣品而且一般可以調整樣品位置（有些廠(chǎng)家甚至提供電動(dòng)樣品升降平臺），所以基本無(wú)需選擇長(cháng)鏡頭或者變焦鏡頭；但是，由于我們需要檢測微弱的化學(xué)發(fā)光，鏡頭的光圈則至關(guān)重要，一般F值越小，其通光量越大，而且成平方反比關(guān)系，因此我們一般需要選擇光圈F值盡量小的鏡頭。另外，如果鏡頭是電動(dòng)的，我們可以省卻打開(kāi)機箱，反復手工調整光圈和聚焦等的煩惱。  

其他我們需要考慮的包括光源、濾光片和暗箱等部件。光源的種類(lèi)和發(fā)光的均一度，濾光片的數量和暗箱的遮光效果等均在我們的考慮范圍之內。當然，一般如果成像儀的CCD和鏡頭配置不錯，一般這些部件也不會(huì )太差。