那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡(jiǎn)單介紹一下淺談層析實(shí)驗中的氣泡問(wèn)題（三）：

       說(shuō)到氣泡，你可能會(huì )聯(lián)想到酣暢淋漓的可樂(lè )，通透上頭的啤酒，亦或是流光飛舞的浪漫，生活中的氣泡，似乎還帶有那么一絲美好，然而對于實(shí)驗來(lái)說(shuō)，尤其是在大多不會(huì )配置在線(xiàn)脫氣單元的FPLC系統上做的層析實(shí)驗，氣泡就如煩人的蒼蠅，鞋里的石子，令人如鯁在喉不吐不快，如若是重要樣品、昂貴填料，氣泡帶來(lái)的實(shí)驗失敗那簡(jiǎn)直是小型災難現場(chǎng)。那么氣泡是源自何來(lái)，而又去之何處，怎么能讓它們從我們的系統里消失，以下此篇，做一個(gè)小小探討，拋磚引玉，共謀對策而滅之。

實(shí)際案例

Fig.1 氣泡造成的UV雜峰

Fig.2 氣泡造成的系統壓力波動(dòng)

這些癥狀基本能覆蓋大部分的層析實(shí)驗問(wèn)題，可見(jiàn)氣泡的破壞力和惱人程度，知己知彼方才能有的放矢，那么氣泡是如何形成的呢？流動(dòng)相中氣體形成的原因有多種，*根本的還是由于氣體在液體中達到過(guò)飽和狀態(tài)；平衡狀態(tài)時(shí)溶解空氣的量與溶液的性質(zhì)、氣體的種類(lèi)有關(guān)，也與外界條件有關(guān), 主要的外界條件有以下 3 種。

● 在層析實(shí)驗中，有很多溶液混合的操作，如置換緩沖，洗脫等等，所以一些溶液的混合需要盡量避免，比如乙醇溶液和鹽溶液，需要用純水隔開(kāi)，否則易造成氣泡析出，所以當乙醇溶液保存的系統需要進(jìn)行實(shí)驗時(shí)，緩沖液是鹽溶液如PBS，我們就需要用純水先做系統沖洗，再做PBS的填充。

Fig.4 緩沖液中析出的氣泡

●如果實(shí)驗設計中，不可避免的需要兩種不同極性溶劑的混合，還要避免氣泡，則需要 從混合處想辦法，一般的層析系統兩相溶劑的混合是在有攪拌裝置的動(dòng)態(tài)混合池中進(jìn)行，混合劇烈，容易析出氣泡，此時(shí)可以考慮將動(dòng)態(tài)混合器改為靜態(tài)混合器，讓溶劑的混合方式由劇烈變?yōu)闇睾?，?huì )有較好的避免氣泡的效果。

 Fig.5 動(dòng)態(tài)混合器和靜態(tài)混合器

另外，除了溶液帶入，系統中的漏點(diǎn)也會(huì )引入氣泡，尤其是未加壓的低壓流路，在管路接頭、閥和轉子等分離結構位置，容易產(chǎn)生漏點(diǎn)，系統中如果發(fā)現有氣泡造成基線(xiàn)波動(dòng)，而在溶液進(jìn)口又沒(méi)發(fā)現可見(jiàn)的氣泡，則需要在系統內查找漏點(diǎn)，有效的辦法是用透明的ETFE管代替不透明的Peek管，觀(guān)察是哪一段出現的氣泡，以便判斷漏點(diǎn)，及時(shí)處理。

Fig.6 管路中漏入的氣泡

關(guān)于溶劑的脫氣方法，目前常用的有兩種：超聲脫氣和負壓脫氣；超聲脫氣就是利用超聲鍋或者超聲探頭，當高功率超聲波耦合到液體中時(shí)，液體分別在高壓和低壓循環(huán)中被壓縮和膨脹，在低壓循環(huán)中，會(huì )產(chǎn)生微小的真空氣泡（所謂的空化氣泡），這些氣泡會(huì )在多個(gè)壓力循環(huán)中增長(cháng)。在氣泡生長(cháng)的那些周期中，液體中的溶解氣體進(jìn)入真空氣泡，這樣真空氣泡就變成了不斷增長(cháng)的氣泡。超聲脫氣特點(diǎn)是操作便捷，效率高，脫氣快，一般10-15分鐘的超聲可以去除溶液中大部分氣泡，缺點(diǎn)是容易發(fā)熱，需要降溫，注意在用超聲鍋脫氣時(shí)，溶劑瓶蓋要擰松或者拿掉；負壓脫氣是利用機械產(chǎn)生負壓的方式使溶液中的氣泡析出，一般分析型色譜儀或者需要高精度檢測的儀器，在流路中配置在線(xiàn)脫氣單元，都是利用負壓的原理進(jìn)行脫氣，實(shí)驗室常用的是真空抽濾裝置，既能過(guò)濾溶液，又能脫氣，實(shí)用性高。

Fig.7 超聲脫氣

Fig.8 真空抽濾裝置

以上就是上海金鵬分析儀器有限公司為大家整理總結關(guān)于淺談層析實(shí)驗中的氣泡問(wèn)題（三）。
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