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淺談層析實(shí)驗中的氣泡問(wèn)題(一)
更新時(shí)間:2022-07-01 點(diǎn)擊次數:1045

那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡(jiǎn)單介紹一下淺談層析實(shí)驗中的氣泡問(wèn)題(一):
       說(shuō)到氣泡,你可能會(huì )聯(lián)想到酣暢淋漓的可樂(lè ),通透上頭的啤酒,亦或是流光飛舞的浪漫,生活中的氣泡,似乎還帶有那么一絲美好,然而對于實(shí)驗來(lái)說(shuō),尤其是在大多不會(huì )配置在線(xiàn)脫氣單元的FPLC系統上做的層析實(shí)驗,氣泡就如煩人的蒼蠅,鞋里的石子,令人如鯁在喉不吐不快,如若是重要樣品、昂貴填料,氣泡帶來(lái)的實(shí)驗失敗那簡(jiǎn)直是小型災難現場(chǎng)。那么氣泡是源自何來(lái),而又去之何處,怎么能讓它們從我們的系統里消失,以下此篇,做一個(gè)小小探討,拋磚引玉,共謀對策而滅之。



關(guān)于氣泡來(lái)源,正如病從口入,無(wú)非就是進(jìn)入系統的開(kāi)口處:流動(dòng)相,或者流路中相對負壓處的漏點(diǎn);如果流動(dòng)相脫氣不理想或儀器本身連接管路、組件存在問(wèn)題,流路中將形成肆意妄為的氣泡,引發(fā)一系列問(wèn)題: 

      1. 組分峰面積變化,峰形變化;
      2. 形成尖峰或鋸齒狀噪聲;
      3. 出現鬼峰 ,基線(xiàn)漂移波動(dòng)增大;
      4. 泵動(dòng)作失常,壓力波動(dòng),檢測基線(xiàn)全抖;
      5. 填料走空,干柱;
      6. 溶解氧可能氧化樣品組分和(或)流動(dòng)相及固定相組分,使檢測失真。

實(shí)際案例



Fig.1 氣泡造成的UV雜峰

Fig.2 氣泡造成的系統壓力波動(dòng)


      這些癥狀基本能覆蓋大部分的層析實(shí)驗問(wèn)題,可見(jiàn)氣泡的破壞力和惱人程度,知己知彼方才能有的放矢,那么氣泡是如何形成的呢?流動(dòng)相中氣體形成的原因有多種,*根本的還是由于氣體在液體中達到過(guò)飽和狀態(tài);平衡狀態(tài)時(shí)溶解空氣的量與溶液的性質(zhì)、氣體的種類(lèi)有關(guān),也與外界條件有關(guān), 主要的外界條件有以下 3 種。






一般來(lái)說(shuō),溶劑中能溶解氣體的量隨溫度的升高而降低,而當溶劑從低溫狀態(tài)下移至高溫時(shí),過(guò)量溶解的氣體以氣泡形式逸出。因此,緩沖液溫度的變化,較易引起氣泡的形成。

● 正如我們配置的緩沖液很多時(shí)候會(huì )保存于層析柜的低溫環(huán)境,當實(shí)驗需要使用時(shí)從層析柜中取出,在室溫環(huán)境下會(huì )帶來(lái)溫度的劇烈變化,改變氣體溶解性,進(jìn)而產(chǎn)生氣泡,影響實(shí)驗,因此緩沖液的使用如果有溫度的變化,需要在實(shí)驗溫度下擺放一段時(shí)間,釋放氣泡后再使用;
● 如果層析儀器是在非恒溫實(shí)驗室,晝夜會(huì )有溫差,白天做完實(shí)驗系統保存,經(jīng)歷夜晚的溫度變化,第*二天系統里很可能會(huì )出現氣泡,此時(shí)實(shí)驗之前充分System wash就非常重要,需要使用高流速將系統內的氣泡吹掃出來(lái),避免影響實(shí)驗。


● 當檢測器池處于較高溫度時(shí),池中易產(chǎn)生氣泡,因為液流通過(guò)檢測器時(shí),溫度升高而此處的壓力反而減小。如果氣泡形成于檢測器池中,則將出現尖峰狀或鋸齒狀的基線(xiàn)噪聲,甚至于*無(wú)法測定,因此在系統流路中,升溫組件與流路保持相應的溫度隔斷,系統流路溫度的均一性,也非常重要。


以上就是上海金鵬分析儀器有限公司為大家整理總結關(guān)于淺談層析實(shí)驗中的氣泡問(wèn)題(一)。

我們上海金鵬分析儀器有限公司是專(zhuān)業(yè)生產(chǎn)超蛋白純化系統、超微量核酸蛋白測定儀、化學(xué)發(fā)光成像系統、凝膠成像分析系統、紫外分析儀、核酸蛋白檢測儀、紫外檢測儀、光化學(xué)反應儀、旋渦混合器、恒流泵、自動(dòng)部分收集器等為核心的十幾個(gè)產(chǎn)品系列的廠(chǎng)家,歡迎大家前來(lái)訂購


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