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薄層色譜法(四)展開(kāi)
更新時(shí)間:2022-04-06 點(diǎn)擊次數:3932

那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡(jiǎn)單介紹一下關(guān)于薄層色譜法(四)展開(kāi):
展開(kāi)
展開(kāi)劑也稱(chēng)溶劑系統,流動(dòng)性或洗脫劑,是在平面色譜中用作流動(dòng)相的液體。展開(kāi)劑的主要任務(wù)是溶解被分離的物質(zhì),在吸附劑薄層上轉移被分離物質(zhì),使各組分的Rf值在0.2~0.8之間并對被分離物質(zhì)要有適當的選擇性。作為展開(kāi)劑的溶劑應滿(mǎn)足以下要求:適當的純度、適當的穩定性、低黏度 、線(xiàn)性分配等溫線(xiàn)、很低或很高的蒸氣壓以及盡可能低的毒性。
展開(kāi)方式總的來(lái)講平面色譜的展開(kāi)有線(xiàn)性、環(huán)形及向心3種幾何形式。
A 單次展開(kāi) 用同一種展開(kāi)劑一個(gè)方向展開(kāi)一次,這種方式在平面色譜中應用*為廣泛。(垂直上行展開(kāi),垂直下行展開(kāi),一向水平展開(kāi),對向水平展開(kāi))
B 多次展開(kāi) 單向對此展開(kāi),用相同的展開(kāi)劑沿同一方向進(jìn)行相同距離的重復展開(kāi),直至分離滿(mǎn)意,廣泛應用于薄層色譜法
C 雙向展開(kāi) 用于成分較多、性質(zhì)比較接近的難分離組分的分離。
薄層展開(kāi)室需預先用展開(kāi)劑飽和,可在室中加入足夠量的展開(kāi)劑,并在壁上貼二條與室一樣高、寬的濾紙條,一端浸入展開(kāi)劑中,密封室頂的蓋,使系統平衡或按正文規定操作。將點(diǎn)好樣品的薄層板放入展開(kāi)室的展開(kāi)劑中,浸入展開(kāi)劑的深度為距薄層板底邊0.5~1.0cm(切勿將樣點(diǎn)浸入展開(kāi)劑中),密封室蓋,待展開(kāi)至規定距離(一般為10~15cm),取出薄層板,晾干,按各品種項下的規定檢測。
影響展開(kāi)的因素
A 相對濕度的影響
B溶劑蒸汽的影響(a 展開(kāi)室的飽和b預吸附)
C 溫度的影響
D 展距的影響與分離度僅正比與展距的平方根。
折疊顯色
A 光學(xué)檢出法
a自然光(400~800nm)
b紫外光(254nm或365nm)
c熒光一些化合物吸收了較短波長(cháng)的光,在瞬間發(fā)射出比照射光波長(cháng)更長(cháng)的光,而在紙或薄層上顯出不同顏色的熒光斑點(diǎn)(靈敏度高、專(zhuān)屬性高)
B 蒸汽顯色法顯色
多數有機化合物吸附碘蒸氣后顯示不同程度的黃褐色斑點(diǎn),這種反應有可逆及不可逆兩種情況,前者在離開(kāi)碘蒸氣后,黃褐色斑點(diǎn)逐漸消退,并且不會(huì )改變化合物的性質(zhì),且靈敏度也很高,故是定位時(shí)常用的方法;后者是由于化合物被碘蒸氣氧化、脫氫增強了共軛體系,因此在紫外光下可以發(fā)出強烈而穩定的熒光,對定性及定量都非常有利,但是制備薄層時(shí)要注意被分離的化合物是否改變了原來(lái)的性質(zhì)。
C 物理顯色法
用紫外照射分離后的紙或薄層后,使化合物產(chǎn)生光加成,光分解、光氧化還原及光異構等光化學(xué)反應,導致物質(zhì)結構發(fā)生某些變化,如形成熒光發(fā)射功能團。發(fā)生熒光增強或淬滅及熒光物質(zhì)的激發(fā)或發(fā)射波長(cháng)發(fā)生移動(dòng)等現象,從而提高了分析的靈敏度和選擇性。
D 試劑顯色法
廣泛應用的定位方法。用于紙色譜的顯色劑一般都適用于薄層色譜,還有防腐劑的顯色劑不適合用于紙色譜及含有有機黏合劑薄層的顯色,又時(shí)噴顯色劑后續加熱,這也不是用于紙色譜。
顯色方法a噴霧顯色:顯色劑溶液以氣溶膠的形式均勻的噴灑在紙和薄層。b 浸漬顯色:揮去展開(kāi)劑的薄層板,垂直的插入盛有展開(kāi)劑的浸漬槽中,設定浸板及抽出速度和規定在顯色劑中浸漬的時(shí)間。
顯色試劑
a 通用顯色劑硫酸溶液(硫酸:水 1:1,硫酸:乙醇1:1)、0.5%碘的氯f(wàn)ang溶液、中性0.05%高錳shuan鉀溶液、堿性高錳shuan鉀溶液(還原性化合物在淡紅色背景上顯黃色斑點(diǎn))
b 專(zhuān)屬顯色劑
⑸測定比移值
在一定的色譜條件下,特定化合物的Rf值是一個(gè)常數,因此有可能根據化合物的Rf值鑒定化合物。
⑹ 薄層掃描
薄層掃描法指用一定波長(cháng)的光照射在經(jīng)薄層層析后的層析板上,對具有吸收或能產(chǎn)生熒光的層析斑點(diǎn)進(jìn)行掃描,用反射法或透射法測定吸收的強度,以檢測層析譜。對于中成藥復方制劑,亦可用相應的原藥材按需要組合作陰、陽(yáng)對照,然后比較其薄層掃描圖譜加以鑒別。使用儀器為薄層掃描儀。
如需用薄層掃描儀對色譜斑點(diǎn)作掃描檢出,或直接在薄層上對色譜斑點(diǎn)作掃描定量,則可用薄層掃描法。薄層掃描的方法,除另有規定外,可根據各種薄層掃描儀的結構特點(diǎn)及使用說(shuō)明,結合具體情況,選擇吸收法或熒光法,用雙波長(cháng)或單波長(cháng)掃描。由于影響薄層掃描結果的因素很多,故應在保證供試品的斑點(diǎn)在一定濃度范圍內呈線(xiàn)性的情況下,將供試品與對照品在同一塊薄層上展開(kāi)后掃描,進(jìn)行比較并計算定量,以減少誤差。各種供試品,只有得到分離度和重現性好的薄層色譜,才能獲得滿(mǎn)意的結果。
 
以上就是上海金鵬分析儀器有限公司為大家整理總結關(guān)于薄層色譜法(四)展開(kāi)。
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