那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡(jiǎn)單介紹一下關(guān)于蛋白質(zhì)的雙向電泳注意事項:
    蛋白質(zhì)的雙向電泳的**向為等電聚焦（Isoelectrofocusing, IEF）,根據蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)不同進(jìn)行分離；二向為SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE），按亞基分子量大小進(jìn)行分離。經(jīng)過(guò)電荷和分子量?jì)纱畏蛛x后，可以得到蛋白質(zhì)分子的等電點(diǎn)和分子量信息。
注意事項：
1. 一向聚焦與二向電泳之間需要平衡，時(shí)間視蛋白質(zhì)的性質(zhì)而定，一般為10min，*多不超過(guò)15min。
2. 過(guò)量的上樣量會(huì )引起雙向圖形畸形，特別在一向聚焦時(shí)，當樣品濃度超過(guò)5mg時(shí)，則蛋白質(zhì)凝聚和沉淀，使二向時(shí)產(chǎn)生水平和垂直條紋。
3. 含尿素的試劑均應避免過(guò)高的溫度處理，一般不要超過(guò)30℃，否則尿素分解產(chǎn)生異硫氰酸鹽會(huì )引起羧基甲?；鴮е码姾刹痪恍?。
4. **向中過(guò)量的去污劑會(huì )嚴重影響雙向電泳圖譜，因此聚焦完畢進(jìn)行平衡前，用雙蒸餾水沖洗膠條，以除去殘留的去污劑。
5. 雙向電泳中雙向凝膠間的界面緊密接觸非常重要，如果接觸不好或者兩者之間留有氣泡，則導致轉移時(shí)分子擴散。
6. 雙向電泳中的條紋現象是常見(jiàn)的問(wèn)題。水平條紋可能與一向電泳時(shí)間不夠，聚焦不好有關(guān)，或者在加樣處產(chǎn)生沉淀和引起重新溶解所致；縱向條紋則表明樣品沒(méi)*溶解，這可以通過(guò)調整樣品量，增加電泳時(shí)間，改善樣品的溶解狀態(tài)，同時(shí)在加樣前通過(guò)高速離心以除掉所有不溶物。
 
以上就是上海金鵬分析儀器有限公司為大家整理總結關(guān)于蛋白質(zhì)的雙向電泳注意事項。
 
我們上海金鵬分析儀器有限公司是專(zhuān)業(yè)生產(chǎn)超微量核酸蛋白測定儀、化學(xué)發(fā)光成像系統、凝膠成像分析系統、紫外分析儀、核酸蛋白檢測儀、紫外檢測儀、蛋白質(zhì)分離純化系統、光化學(xué)反應儀、旋渦混合器、恒流泵、自動(dòng)部分收集器等十幾個(gè)系列產(chǎn)品的廠(chǎng)家，歡迎大家前來(lái)訂購