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分子篩(凝膠過(guò)濾層析)蛋白純化系統的優(yōu)缺點(diǎn)
更新時(shí)間:2021-04-22 點(diǎn)擊次數:3912

那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡(jiǎn)單介紹一下關(guān)于分子篩(凝膠過(guò)濾層析)蛋白純化系統的優(yōu)缺點(diǎn):
 
分子篩定義:
 
分子篩層析,又稱(chēng)為凝膠過(guò)濾層析或體積排阻層析。分子篩層析是利用有一定孔徑范圍的多孔凝膠作為固定相,對混合物中各組分按分子大小進(jìn)行分離的層析技術(shù)。具有分子篩作用的物質(zhì)很多,如浮石、瓊脂、瓊脂糖、聚乙烯醇、聚丙烯酰胺、葡聚糖凝膠等。
 
避開(kāi)原因一:工藝放大困難
分子篩層析無(wú)法遵循線(xiàn)性放大原則,即使遵循柱床高度不變的原則,工藝流速如何進(jìn)行調整,也是需要面臨的問(wèn)題。為保證良好的分離效果,分子篩層析需要求相對較高的裝填高度,然而裝填高度偏高,反壓也勢必會(huì )偏高。由于層析填料的耐壓有限,在保證不超壓的前提下,工藝流速會(huì )明顯受限,這會(huì )使得整個(gè)純化過(guò)程時(shí)間漫長(cháng)。
 
避開(kāi)原因二:層析柱裝填困難
在進(jìn)行層析柱裝填時(shí),勻漿液濃度需要在一定的范圍內(50%-70%),方可保證沉降均勻、柱效良好,這對層析柱的規格選型有著(zhù)特殊要求。高度100 cm的層析柱,在勻漿濃度50%-70%時(shí),假設壓縮系數為1.15,則實(shí)際使用高度為43.5-60.9 cm,這往往無(wú)法達到某些使用者的要求。若選配裝柱器,并考慮柱頭所占空間,這要求實(shí)驗空間需高度充足。若考慮將2根層析柱串聯(lián)使用,則要求2根層析柱的柱效相當,才可保證分離效果良好,這對裝填技術(shù)也有著(zhù)較高要求。
 
避開(kāi)原因三:測定柱效困難
常規柱效測定方法,要求平衡1.5-2 CV,進(jìn)樣后,洗脫至出峰(參考值:2 CV),流速30 cm/h。若假設裝填高度為60 cm,平衡、洗脫體積總計3.5 CV,經(jīng)計算,測定一次柱效,需耗時(shí)7小時(shí)??梢韵胂?,當發(fā)現柱效不理想,需要重新裝填并測定柱效時(shí),過(guò)程是很繁瑣、耗時(shí)的。
 
避開(kāi)原因四:維護保養操作困難
當層析柱使用完畢,用20%乙醇保存時(shí),同樣也很耗時(shí)。而且當再次使用時(shí),用水將20%乙醇置換走,一般需要3 CV以上,而且由于該過(guò)程反壓較大,通常還需要降低流速進(jìn)行。
 
總之,采用分子篩層析,各個(gè)環(huán)節都很繁瑣、耗時(shí),因此,在進(jìn)行層析工藝設計時(shí),要盡量避開(kāi)分子篩層析。
 
以上就是上海金鵬分析儀器有限公司為大家整理總結關(guān)于分子篩(凝膠過(guò)濾層析)蛋白純化系統的優(yōu)缺點(diǎn)。
我們上海金鵬分析儀器有限公司是專(zhuān)業(yè)生產(chǎn)超微量核酸蛋白測定儀、化學(xué)發(fā)光成像系統、凝膠成像分析系統、紫外分析儀、核酸蛋白檢測儀、紫外檢測儀、蛋白質(zhì)分離純化系統、光化學(xué)反應儀、旋渦混合器、恒流泵、自動(dòng)部分收集器等十幾個(gè)系列產(chǎn)品的廠(chǎng)家,歡迎大家前來(lái)訂購
 

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